1.QTE12937 小鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒ELISA进行夹心法配对抗体
(1) 加入包被缓冲液稀释好的捕获抗体。
(2) 孵育,然后清洗。
(3) 用封闭缓冲液孵育,然后清洗,以阻断蛋白的非特异性结合。
(4 ) 在微孔板中加入标准品、对照品和样本,需做复孔。
(5) 孵育微孔板,然后清洗。
(6) 加入检测抗体。孵育,然后清洗。
(7) 加入 HRP 链霉亲和素溶液进行检测。孵育,然后清洗。
(8) 加入 TMB 底物检测。
(9.) 加入终止液。
(10. ) 酶标仪读数,终点法用波长450 nm测定,动态读数用波长600 nm测定。
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2.QTE12937 小鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒数据分析
计算空白对照(零)标准品的平均吸光度值。用所有其他吸光度值减去空白对照标准品吸光度平均值。绘制各标准品已扣除平均空白对照的吸光度值(y 轴)与标准品已知蛋白浓度(x 轴)的关系图,创建标准曲线。使用绘图软件拟合贯穿这些点的佳曲线,作为标准曲线。注:大多数酶标仪软件或绘图软件可以通过数值做出标准曲线。通常来说,四参数曲线拟合 (4 PL) 是佳选择;但其他算法(例如线性、半对数、对数/对数、5-参数逻辑)也可以用来拟合更好的标准曲线。
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